Práctica7:Toxoplasmosis

OBJETIVO

Determinar cualitativamente Ac séricos dirigidos contra Toxoplasma gondii por hemaglutinación indirecta.

MATERIAL

·         Placa microtitter.

·         Micropipeta

·         Centrífuga.

·         Estufa.

REACTIVOS

·         Hematíes sensibilizados y no sensibilizados.

·         Tampón fosfato.

·         Adsorbente.

·         Control +

·         Control -

MUESTRA

·         Suero fresco.

PROCEDIMIENTO

1.       Preparamos una dilución madre del suero a analizar 1/40 (50μl de suero y 1,95ml de tampón fosfato). Con ayuda de una micropipeta, dispensamos 50μl de tampón fosfato en 8 pocillos.

2.       Dispensamos 50μl de disolución madre en el pocillo 1.

3.       Mezclamos con el tampón y transferimos 50μl del pocillo nº1 al 2, del 2 al 3 y así sucesivamente hasta el 6 pocillo, descartando los últimos 50μl.

4.       Dispensar 50μl de la dilución madre de suero en el pocillo 7.

5.       Mezclamos con el tampón y descartamos 50μl. Esta dilución (1/80) constituye el suero control, cuyo papel es detectar las aglutininas naturales anti-ovino que pueden contener ciertos sueros.

6.       Agitamos cuidadosamente las suspensiones de hematíes.

7.       Depositamos 1 gota de hematíes sensibilizados en los primeros 6 pocillos.

8.       Depositamos 1 gota de hematíes no sensibilizados en el 7 pocillo (suero control).

9.       Depositamos 1 gota de hematíes sensibilizados en el 8 pocillo cuyo papel es controlar la validez del tampón y de los hematíes sensibilizados.

10.   Homogeneizamos muy cuidadosamente el contenido de los pocillos.

11.   Dejamos 2 horas inmóvil y al pasar esas 2 horas leemos los resultados.

RESULTADOS

La práctica no salió bien debido a que en el la fila B, al último pozo se le echó un reactivo equivocado