Práctica 1: PCR Latex

OBJETIVO

Determinar cualitativamente/ semicuantitativamente  la Proteína C-Reactiva (PCR) IVD

FUNDAMENTO

Las partículas de látex recubiertas con anticuerpos anti-PCR humana son aglutinadas por moléculas de PCR presentes en la muestra del paciente.

REACTIVOS

·         Látex: Suspensión de partículas de látex cubiertas de IgG de cabra anti-PCR humana, pH 8,2  más un conservante.

·         Control + (tapón rojo): Suero humano con una concentración de PCR > 20 mg/L más un conservante

·         Control - (tapón azul): Suero animal con conservante.

MATERIAL

·         Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 80-100rpm

·         Agitador vortex

·         Pipetas 50 μL

MUESTRA

·         Suero fresco

PROCEDIMIENTO

MÉTODO CUALITATIVO

Atemperamos los reactivos

Seguidamente depositamos 50 μL de la muestra y una gota de cada uno de los controles, positivo y negativo, sobre círculos distintos de un porta

Posteriormente mezclamos el reactivo de PCR-látex vigorosamente o con el agitador vortex antes de usar y depositamos 50 μL junto a cada una de las gotas anteriores.

Mezclamos las gotas con un palillo extendiendo por toda la superficie del círculo. Para cada muestra hay que utilizar un palillo diferente.

Finalmente situamos el porta sobre un agitador rotatorio a 80-100rpm y agitamos 2 min.

 

MÉTODO SEMICUANTITATIVO

Realizamos diluciones dobles de la muestra en solución salina 9 g/L y procedemos para cada dilución como en la prueba cualitativa.